Fluoreszenz

Absorption

Einige Moleküle absorbieren einfallendes Licht bei bestimmten Wellenlängen. Die Elektronen in diesen Molekülen werden auf einen unstabiles Energiezustand S1 angehoben.
 

Emmision

Die angeregten Moleküle senden Licht aus, um auf ihren ursprünglichen Energiezustand S0 zurückzukommen. Die Energie des ausgesendeten Photons entspricht dabei nicht genau der Energiedifferenz zwischen den beiden Zuständen S0 und S1.
Kleine Verluste finden bei der Umwandlung zwischen den verschiedenen Rotations- und Vibrationsenergien jedes Zustandes statt. Deshalb ist die Anregungsenergie E1 immer größer als die Energie des ausgesendeten Lichts.
Wegen und gilt: .

Fluoreszenz Spektrum

Die Spektren von Absorption und Fluoreszenz sind verschoben. Grund dafür sind Energieverluste in den Anregungs- und Emissionsprozessen. Das Fluoreszenzspektrum ist daher langwelliger als das Absorptionsspektrum.

Energie

Bei einem Laser wird Licht sehr schmalbandig erzeugt. Man erreicht damit viel höhere Energiedichten als bei konventionellen Lichtquellen (z.B. Xenon-Lampe). Die Floureszenz ist proportional zur Anregungsintensität. Dadurch erreicht man mit Laser viel höhere Emissionsintensitäten.

Empfindlichkeit

Die Empfindlichkeit beim LIF-Detektor ist ein hundertfaches im Vergleich zu herkömmlichen UV-Floureszenz-Detektoren. In vielen Fällen wird sogar eine 100.000 mal bessere Empfindlichkeit erreicht. Beispiel:
links
Fluoreszenz Detektor
Shimadzu
Inj.Vol.10µl

rechts
LIF Detektor
Picometrics
Inj.Vol. 5µl
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